Rosmarino, Salvia e Lavanda nelle patologie neurologiche

 

Centinaia di milioni di persone in tutto il mondo soffrono di disturbi neurologici o li hanno sperimentati in modo intermittente, il che ha ridotto significativamente la loro qualità di vita.

I trattamenti comuni per i disturbi neurologici sono relativamente costosi e possono portare a un’ampia varietà di effetti collaterali tra cui attacchi di sonno, effetti collaterali gastrointestinali, cambiamenti della pressione sanguigna, ecc.

D’altra parte, diversi farmaci a base di erbe hanno guadagnato una popolarità colossale in tutto il mondo negli ultimi anni a causa della loro disponibilità, prezzi accessibili e pochi effetti collaterali.

Piante aromatiche, Salvia (Salvia officinalis), Lavanda (Lavandula angustifolia) e Rosmarino (Salvia Rosmarinus) hanno già mostrato effetti ansiolitici, antinfiammatori, antiossidanti e neuroprotettivi. Hanno anche mostrato un potenziale nel trattamento dei disturbi neurologici comuni, tra cui il morbo di Alzheimer, il morbo di Parkinson, l’emicrania e i disturbi cognitivi.

Questa recensione riassume i dati sul potenziale neuroprotettivo di erbe aromatiche, Salvia, Lavanda e Rosmarino.

introduzione

Un disturbo neurologico è descritto come qualsiasi condizione che provoca un danno funzionale o strutturale al sistema nervoso. I disturbi neurologici rappresentano la seconda principale causa di morte a livello globale e la prima principale causa di disabilità poiché in genere causano deterioramento cognitivo o disfunzione sensomotoria che portano a una ridotta qualità della vita quotidiana.

A causa dell’elevato tasso di mortalità e morbilità dei disturbi neurologici, le strategie preventive e terapeutiche sono cruciali. I farmaci convenzionali somministrati per il trattamento dei disturbi neurologici sono associati a diversi eventi avversi; pertanto, i possibili effetti terapeutici dei prodotti naturali sulle condizioni neurologiche sono stati affrontati da molti ricercatori negli ultimi anni (Ahmadi et al., 2022).

Una varietà di farmaci a base di erbe ha attirato l’attenzione dei ricercatori nell’ultimo decennio, grazie alla loro disponibilità, al prezzo più basso e ai rari effetti collaterali (Abdel-Aziz et al., 2016).

Erbe aromatiche come Salvia (Salvia officinalis), Rosmarino (Salvia Rosmarinus) e Lavanda (Lavandula angustifolia) hanno mostrato effetti neuroprotettivi promettenti in studi recenti (Kashani et al., 2011; Jamison, 2012; Jemia et al., 2013; Alvi et al., 2019; Mohseni et al., 2020; Caputo et al., 2021).

La Salvia Rosmarinus è una pianta erbacea sempreverde che appartiene alla famiglia delle Lamiaceae.

La Salvia Rosmarinus cresce naturalmente nella macchia secca e nelle aree rocciose delle regioni mediterranee dell’Europa meridionale fino all’Asia occidentale e ha potenziali proprietà antibatteriche, antifungine, antiossidanti e antinfiammatorie (Leporini et al., 2020).

Sono stati suggeriti gli effetti terapeutici della Salvia Rosmarinus su una varietà di disturbi cognitivi come il morbo di Parkinson, il neuroblastoma, il glioblastoma e l’epilessia (Park et al., 2008; de Oliveira et al., 2016; Giacomelli et al., 2016; El Alaoui et al., 2017; Yildirim e Kitis, 2020).

La Lavandula angustifolia è una nota erba aromatica della famiglia delle Lamiaceae.

La Lavandula angustifolia è originaria delle aree mediterranee con effetti antibatterici, antifungini e antiossidanti (Erland e Mahmoud, 2016). Le proprietà neuroprotettive della Lavandula angustifolia sono state descritte in letteratura. È stato riscontrato che demenza, glioblastoma, neuroblastoma, neurotossicità, epilessia, morbo di Parkinson ed emicrania rispondono al trattamento con Lavandula angustifolia (Arzi et al., 2011; Sasannejad et al., 2012; Hancianu et al., 2013; Caputo et al. ., 2016, 2021; Nikolova et al., 2016; Chan et al., 2020).

La Salvia officinalis è una pianta della famiglia delle Labiatae/Lamiaceae. È originario del Medio Oriente e delle regioni mediterranee. La Salvia officinalis è stata tradizionalmente utilizzata per il trattamento di una vasta gamma di disturbi come convulsioni, ulcere, gotta, reumatismi e infiammazioni (Ghorbani e Esmaeilizadeh, 2017). Sono stati segnalati gli effetti della Salvia officinalis su diversi disturbi neurologici come deficit cognitivi, glioblastoma, neurotossicità, sclerosi multipla e ictus ischemico (Iuvone et al., 2006; Kennedy et al., 2011; Seyedemadi et al., 2016; Li et al., 2018; Choukairi et al., 2020).

Questo studio si propone di riassumere i dati sul potenziale neuroprotettivo di Salvia, Lavanda e Rosmarino.

Materiali e metodi

Le parole chiave ricercate per la presente revisione della letteratura erano Salvia (Salvia officinalis), Lavandula (Lavanda, Lavandula angustifolia), Rosmarino (Salvia Rosmarinus, Rosmarinus officinalis), demenza, glioblastoma, neurotossicità, neuroinfiammazione, glioma, morbo di Alzheimer, convulsioni, epilessia, emicrania, neuroblastoma, morbo di Parkinson, neurodegenerativo, stress ossidativo e neuroprotettivo. Abbiamo cercato articoli in inglese in vari database online pubblicati nel dicembre 2021 (tra cui Google Scholar, Web of Science, PubMed, Science Direct, Scopus, Embase e ResearchGate). Pertanto, gli articoli estratti sono stati esaminati.

Rosmarino

Disturbi cognitivi

ROSMARINO NEI DISTURBI COGNITIVI

I disturbi cognitivi (come amnesia, demenza e delirio) sono una classe di disturbi di salute mentale che influenzano principalmente l’apprendimento, la memoria e il concepimento. I pazienti con disturbi cognitivi non sono completamente orientati al tempo e allo spazio (Festinger, 1957). Moss et al., hanno studiato l’effetto dell’acqua di Rosmarino sugli esiti cognitivi e cerebrovascolari negli adulti sani.

I dati di questo studio hanno suggerito gli impatti positivi dell’acqua di Rosmarino sul miglioramento dell’attività mentale. È stato osservato che il livello di emoglobina ossidata durante la funzione cognitiva nel gruppo sperimentale era significativamente più alto rispetto agli altri gruppi e i dati totali hanno mostrato un effetto positivo e significativo del succo di Rosmarino.

Pertanto, i composti dell’acido rosmarinico possono semplificare le prestazioni attraverso le vie colinergiche (Moss et al., 2018). Yildirim et al. ha esaminato l’effetto delle piante aromatiche sui disturbi cognitivi negli anziani.

Durante questo studio pre e post-test, a 39 adulti è stato somministrato olio di Rosmarino, limone e Lavanda da annusare per una settimana. Sono state valutate la qualità del sonno e le funzioni cognitive. I risultati hanno mostrato che l’aromaterapia ha un effetto positivo sulle funzioni cognitive negli anziani. Inoltre, riduce la sensazione di sonnolenza durante il giorno.

Pertanto, l’olio di Rosmarino e limone è efficace nel controllare la qualità del sonno e può migliorare i disturbi cognitivi controllando la memoria e avendo un effetto calmante sui nervi simpatici (Yildirim e Kitis, 2020).

In un altro studio, Li et al. hanno esaminato l’effetto dell’acido di Rosmarino sul deterioramento cognitivo e sull’ipossia-ischemia, nonché sul rafforzamento della mielina. In questo studio, i topi indotti da ischemia e ipossia hanno ricevuto 20 mg di acido di Rosmarino per via intraperitoneale al giorno per 5 giorni. I risultati hanno mostrato che l’acido di Rosmarino potrebbe migliorare i disturbi del movimento, la cognizione e la memoria spaziale a causa degli effetti dell’ipossia-ischemia. È stato anche scoperto che l’acido di Rosmarino inibisce parzialmente la degradazione della mielina dei neuroni del corpo calloso e può aumentare gli inibitori dell’apoptosi degli oligodendrociti (Li et al., 2020).

Canzone et al. ha dimostrato che il trattamento con estratto di Rosmarino in lesioni cerebrali traumatiche lievi (TBI) ripetitive di ratti ha migliorato i deficit cognitivi attraverso una diminuzione della degenerazione neuronale e dell’astrocitosi attraverso la riduzione delle cellule positive alla proteina acida fibrillare gliale, la generazione di specie reattive dell’ossigeno (ROS), l’attivazione della superossido dismutasi, la catalasi, glutatione perossidasi, livelli proteici di interleuchina-1 (IL-1), IL-6 e necrosi tumorale-alfa (TNF-α) nell’ippocampo.

L’estratto di Rosmarino riduce la concentrazione di ROS e aumenta l’attività di GPx, CAT e SOD, riducendo il numero di neuroni degenerati e migliorando i deficit cognitivi. Di conseguenza, l’estratto di Rosmarino può essere una potenziale terapia per migliorare i deficit cognitivi nei pazienti con trauma cranico lieve ripetitivo. I suoi meccanismi potrebbero essere mediati da attività antinfiammatorie e antiossidanti (Song et al., 2016). Numerosi altri studi hanno inoltre dimostrato gli effetti positivi del Rosmarino o dei suoi composti attivi nei disturbi cognitivi (Pengelly et al., 2012; Moss, 2017; Araki et al., 2020).


 

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Lavanda Stoechas

Lavanda

Demenza

LAVANDA E DEMENZA

La Lavanda ha dimostrato efficacia nel trattamento della demenza. Nel 2013, Hancianu et al. hanno condotto uno studio per valutare gli effetti neuroprotettivi dell’olio di Lavanda per inalazione su ratti con demenza indotta da scopolamina. Questo studio e altri due hanno dimostrato che una parte significativa degli effetti dell’olio di Lavanda sulla demenza è esercitata dalle sue proprietà antiossidanti e anti-apoptotiche.

La frazione acquosa di L. Stoechas influenza la demenza in diversi modi. Riduce l’AChE che degrada l’acetilcolina nelle sinapsi e può portare alla demenza. D’altra parte, riduce il danno neurale e la perdita di memoria dovuti allo stress ossidativo aumentando i livelli di SOD, CAT e glutationi. La frazione acquosa può anche diminuire il decadimento neuronale causato dalla perossidazione lipidica riducendo i livelli di MDA (Hancianu et al., 2013;

Mushtaq et al., 2018a,b). Hritcu et al. hanno studiato anche gli effetti dell’olio essenziale di Lavanda sulla memoria spaziale. Hanno compromesso la memoria spaziale di cinquanta ratti utilizzando scopolamina e poi i ratti sono stati messi in contatto con olio essenziale di Lavanda per 7 giorni. Questo studio ha dimostrato che la Lavanda influisce sul sistema colinergico e inverte il deterioramento della memoria; pertanto, migliora la memoria.

Questi effetti sono dovuti principalmente alla presenza di linalolo nell’olio di Lavanda (Hritcu et al., 2012). Kashani et al. esaminato le influenze dell’estratto acquoso di Lavanda sul funzionamento spaziale dei ratti affetti da AD; hanno capito che l’estratto di Lavanda potrebbe migliorare in modo eccellente le carenze di apprendimento spaziale nell’AD, diminuendo la neurotossicità indotta dal glutammato, portando alla morte delle cellule neurali (Kashani et al., 2011). Zali et al. hanno studiato le proteine bersaglio specifiche nell’ippocampo dei ratti siringati con Aβ; lo studio ha dimostrato che l’estratto di Lavanda ha un effetto positivo sulle prestazioni dei ratti AD diminuendo la formazione di Aβ.

Hanno concluso che l’estratto di Lavanda potrebbe essere una sostanza utile come farmaco per l’AD e altri tipi di malattie neurodegenerative esprimendo proteine neuroprotettive nell’ippocampo come bersagli farmacologici (Zali et al., 2015).

Soheili et al. hanno dimostrato che l‘estratto acquoso di Lavandula angustifolia modifica le carenze di memoria dell’AD nei modelli animali. Questo studio ha dimostrato che l’estratto di Lavanda elimina efficacemente le placche Aβ dal cervello dei ratti affetti da AD. Ai ratti è stato iniettato Aβ per via intracerebroventricolare. L’estratto ha ridotto il livello di Aβ nel cervello mediante la clearance plasmatica di Aβ.

Inoltre, la Lavanda può subire la clearance epatica dell’Aβ perché il livello di clearance epatica dell’Aβ indica i livelli disponibili di Aβ plasmatico da trasportare nel cervello (Soheili et al., 2012).

In un altro studio, Xu et al. hanno valutato l’effetto dell’olio di Lavanda sulla scopolamina, che è una causa significativa di deficit cognitivi, e anche sull’H2O2 in uno studio in vivo e in vitro. I risultati di questo studio hanno mostrato che l’olio di Lavanda ha abbassato l’attività del livello di acetilcolinesterasi della malondialdeide e ha aumentato l’attività della superossido dismutasi e della glutatione perossidasi. Inoltre, potrebbe svolgere un ruolo nella protezione delle cellule pc12 dall’H2O2.

Si è concluso che l’olio di Lavanda in vitro (H2O2 nelle cellule PC12) e in vivo (topi scopolamina) potrebbe esibire una funzione neuroprotettiva, regolando la funzione dell’acetilcolinesterasi e lo stress ossidativo. I

risultati hanno dimostrato che il trattamento con olio essenziale di Lavanda ha ripristinato la diminuzione della glutatione perossidasi indotta dalla scopolamina e della superossido dismutasi nell’ippocampo e ha ridotto l’alto livello di malondialdeide nei topi curati con scopolamina. Hanno concluso che questa erba aveva effetti mnemonici piuttosto che effetti sensomotori. Quindi, sulla base della correzione dei sistemi colinergici, la diminuzione dello stress ossidativo potrebbe essere efficace nei problemi cognitivi (Xu et al., 2016).

Panxu et al. hanno studiato gli impatti dell’olio essenziale di Lavanda e anche del suo componente importante, il linalolo, sulla disabilità cognitiva. Questo studio ha dimostrato che l’olio essenziale di Lavanda e il linalolo proteggono notevolmente la funzione acquisita dell’acetilcolinesterasi e che la sostanza malondialdeide protegge anche la funzione ridotta della superossido dismutasi, la glutatione perossidasi.

Inoltre, hanno protetto in modo significativo l’espressione repressa del fattore 2 correlato al fattore nucleare eritroide 2 e dell’eme ossigenasi-1. Inoltre, con il trattamento farmacologico è stata ottenuta una ridotta espressione di proteine correlate alla plasticità delle sinapsi, al fattore neurotrofico derivato dal cervello, a p-CaMKII e alla proteina chinasi II calcio-calmodulina-dipendente (CaMKII).

Per riassumere, l’olio essenziale di Lavanda e il linalolo potrebbero proteggere l’espressione della proteina della via del fattore 2/eme ossigenasi-1 correlato al fattore nucleare eritroide 2, all’attività colinergica, allo stress ossidativo e alla plasticità sinaptica.

Pertanto, l’olio essenziale di Lavanda e il linalolo possono essere considerati un possibile agente per il miglioramento della disabilità cognitiva nell’AD (Xu et al., 2017).

 

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OLIO ESSENZIALE DI LAVANDA

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Salvia

Deficit cognitivi

SALVIA E DISTURBI COGNITIVI

L’effetto della Salvia è stato studiato sui deficit cognitivi. Kennedy et al. hanno studiato 36 soggetti sani che hanno ricevuto estratto orale di Salvia. Questi risultati hanno mostrato un miglioramento delle prestazioni della memoria secondaria, una diminuzione dell’affaticamento mentale e un’elevata vigilanza mediante l’inibizione dell’AChE (Kennedy et al., 2011).

Nel 2018, Wightman EL et al. hanno esaminato gli effetti della combinazione di Salvia sulle prestazioni cognitive in 94 individui. Il notevole vantaggio di questa combinazione è stato osservato nell’accuratezza cognitiva e nella memoria di lavoro sia in acuto che in cronico. Probabilmente, un ampio aggiustamento della risposta del CBF è responsabile del significativo aumento delle prestazioni cognitive dopo aver consumato il tè greco di montagna il giorno 1. È più probabile che i benefici del giorno 28 siano correlati alla riduzione dell’ansia di stato, il che implica che il primo meccanismo è più efficace. probabilmente faciliterà gli impatti cognitivi acuti e quest’ultimo meccanismo ha maggiori probabilità di sostenere miglioramenti cognitivi a lungo termine (Wightman et al., 2018).

Sono stati condotti complessivamente altri due studi (su giovani adulti e adolescenti) con una dose singola di 150 e 300 mg di estratto di Salvia, rispettivamente. È stato dimostrato un netto miglioramento in seguito al consumo di estratto di Salvia nella valutazione delle prestazioni cognitive e della memoria a breve termine in giovani adulti sani, che sono simili a studi precedenti sugli anziani (Edwards et al., 2021).

Allo stesso modo, un recente studio randomizzato condotto su casi giovani e sani ha dimostrato che la combinazione di vari estratti fenolici e aromatici come la Salvia potrebbe avere effetti benefici significativi sulla funzione cerebrale (Jackson et al., 2020).

Kennedy et al. hanno somministrato diverse concentrazioni di Salvia (300, 600 mg di foglie di Salvia essiccate, placebo) in 30 individui giovani e sani, portando a un miglioramento delle prestazioni cognitive, dell’umore e dello stato di ansia grazie agli effetti inibitori della colinesterasi della Salvia (Kennedy et al., 2006). Nel 2019, Tober C et al. considerato un ampio spettro farmacodinamico della Salvia Officinalis con effetti speciali, osservati sulla neurotrasmissione della serotonina, nonché sui recettori μ-oppioidi, muscarinici M3 e adrenergici α2A.

Hanno suggerito una potente modulazione dei trasportatori della serotonina e dei neurorecettori come modalità d’azione, che potrebbe normalizzare le risposte termoregolatorie e possibilmente il deterioramento mentale prima della menopausa. Inoltre, l’utilizzo di foglie fresche di Salvia officinalis ha avuto un’attività maggiore rispetto agli estratti di piante essiccate (Tober e Schoop, 2019).


SALVIA NELLA DEMENZA

Demenza

Akhondzadeh et al. hanno studiato l’effetto degli estratti di Salvia officinalis sul trattamento dei casi di AD da lievi a moderati. Hanno progettato uno studio randomizzato con 39 pazienti a Teheran. Casi da lievi a moderati di AD di età compresa tra 65 e 80 anni sono stati inclusi nell’assunzione di determinate dosi di estratto di Salvia officinalis o placebo. Dopo 4 mesi, l’estratto di Salvia officinalis ha mostrato un effetto notevolmente migliore sulle funzioni cognitive rispetto al placebo (Akhondzadeh et al., 2003).

Abozaid et al. hanno valutato il possibile effetto delle nanoparticelle di Mg-Salvia officinalis sul trattamento dell’AD indotta da cloruro di alluminio (ALCL3) nei ratti. Lo studio ha riportato che l’AD indotta da ALCL3 nei ratti provoca notevoli cambiamenti nei livelli di acetilcolina e di proteina tau nel tessuto cerebrale. Il trattamento con nanoparticelle di Mg-Salvia officinalis nei ratti AD ha causato un miglioramento significativo di questi parametri.

In conclusione, il trattamento con nanoparticelle di Mg-Salvia officinalis migliora lo stress ossidativo e potenzia il sistema di difesa antiossidante (Elkomy et al., 2021).

Fatima et al. hanno studiato gli effetti neuromodulatori dell’estratto di Salvia su ratti intossicati da cloruro di alluminio. Hanno scoperto che la somministrazione di 500 mg/kg di questo estratto non solo migliora i parametri comportamentali ma inverte anche la diminuzione del contenuto di acetilcolinesterasi. Pertanto, sono stati dimostrati gli effetti vantaggiosi della Salvia nell’alleviare il morbo di Alzheimer grazie alla sua attività antiossidante e inibitrice dell’acetilcolinesterasi e alla sua capacità di migliorare le funzioni cognitive e la memoria (Fatima e Tabassum, 2020).

Scholey et al. hanno eseguito uno studio randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo per valutare gli effetti di un estratto di Salvia officinalis sulle prestazioni cognitive negli anziani. Un totale di venti partecipanti di età superiore ai 65 anni hanno ricevuto un placebo e quattro dosi di estratto di Salvia officinalis (167, 333, 666 e 1.332 mg). Hanno concluso che la dose da 333 mg era associata a un notevole miglioramento della memoria secondaria. Le altre dosi hanno mostrato lo stesso effetto in misura minore. Inoltre, l’estratto ha inibito l’attività anticolinesterasica, determinando una riduzione del 50% della degradazione del substrato da parte della colinesterasi umana (Scholey et al., 2008). Tuttavia, non tutti gli studi hanno riportato gli effetti benefici della Salvia sulla memoria.

Perry et al. hanno valutato gli effetti di una combinazione di Salvia, Melissa e Rosmarino sul ricordo verbale in partecipanti sani. Un totale di 44 soggetti sani hanno partecipato a questo studio pilota in doppio cieco, randomizzato e controllato con placebo. Nel complesso, non sono state osservate differenze significative tra i gruppi di trattamento e quelli con placebo rispetto al basale per quanto riguarda il ricordo immediato e ritardato delle parole. Tuttavia, l’analisi dei sottogruppi ha evidenziato che i partecipanti di età inferiore a 63 anni hanno mostrato notevoli miglioramenti nel ricordo ritardato delle parole e non sono stati osservati effetti avversi (Perry et al., 2018).


Conclusione

Complessivamente, gli articoli inclusi hanno studiato gli effetti di erbe aromatiche, estratti di Lavanda, Rosmarino e Salvia su disturbi cognitivi, morbo di Alzheimer, demenza, epilessia, convulsioni, glioblastoma, glioma, emicrania, neuroblastoma, morbo di Parkinson e sclerosi multipla.

Le erbe aromatiche si sono rivelate efficaci in diverse malattie neurologiche e questa revisione le suggerisce come potenziali medicine complementari.

Questa recensione mostra il potenziale effetto dell’estratto di Rosmarino sul miglioramento dell’attività cognitiva, sulla regolazione dei disturbi dell’umore attraverso l’aumento della concentrazione di BDNF e sulla riduzione dello stress mentale negli anziani;

inoltre, in studi sperimentali, ha mostrato potenti attività antiossidanti, antinfiammatorie, anti-acetilcolina esterasi, nonché effetti neuroprotettivi. L’effetto antitumorale del Rosmarino nelle cellule di neuroblastoma viene esercitato inducendo l’apoptosi attraverso la fosforilazione di ROS, MAPK e p38. Inoltre, il Rosmarino promuove l’ERK1/2 e diminuisce la morte cellulare nel morbo di Parkinson e riduce lo stato di agitazione nei pazienti affetti da demenza.

Gli studi su modelli animali hanno dimostrato che l’estratto di Lavanda ha un potenziale effetto sulle prestazioni nella formazione di AD Aβ. Inoltre, l’olio essenziale di Lavanda può influenzare i problemi cognitivi diminuendo lo stress ossidativo basato sui sistemi colinergici. Alcune ricerche hanno dimostrato che la Lavanda agisce come un antagonista del recettore AMPA e impedisce al glutammato di legarsi ad esso e di conseguenza previene la disregolazione del Ca2+ e la disfunzione sinaptica in queste malattie. Questo studio ha dimostrato che l’olio essenziale di Lavandula potrebbe avere un’impressione protettiva contro la distruzione dei neuroni aumentando l’espressione genica di fattori neurotrofici derivati ​​dal cervello in pazienti con recidiva remittente con SM nel sangue periferico.

Studi clinici hanno studiato l’effetto della Salvia sull’AD e sulla demenza attraverso il miglioramento della memoria secondaria e delle funzioni cognitive. Nei modelli animali di convulsioni e SM, sono stati osservati rispettivamente un notevole aumento della soglia convulsiva e una riduzione della demielinizzazione e dell’infiammazione nel sistema nervoso centrale. Inoltre, l’estratto può influenzare la demenza inibendo l’attività anticolinesterasica, con conseguente riduzione del 50% della degradazione del substrato da parte della colinesterasi umana.

In generale, le prove supportano questi estratti di erbe aromatiche in varie malattie neurologiche, riducendo il livello di stress ossidativo e i marcatori di infiammazione. In futuro, saranno necessari ulteriori studi clinici per studiare gli effetti dei medicinali erboristici aromatici per la gestione dei disturbi neurologici, e saranno necessari ulteriori studi in vivo e in vitro per identificare meglio i meccanismi d’azione sottostanti di questi medicinali erboristici in diverse malattie.

Fonte

PUBMED


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